mercredi 1 juin 2016

Potentiel Hémolytique

Test d'hémolyse réalisé en microplaques à 96 puits
L'hémolyse est la libération de l'hémoglobine des globules rouges suite à une destruction de ces derniers ou à la perméabilisation de leur membrane cellulaire. L'hémolyse est un effet indésirable qu'on cherche à éviter lorsqu'on administre une molécule à un animal ou à un être humain, d'où l'intérêt de tester le potentiel hémolytique de toutes molécules à potentiel thérapeutique lors de leur développement pré-clinique.
Le test de potentiel hémolytique consiste à mettre des globules rouges (du sang) en présence du composé testé durant une certaine période de temps, ensuite de centrifuger le milieu de test (tubes ou microplaques) pour séparer les globules rouges (encore intègres ou rompus) du plasma sanguin dans lequel se trouve l'hémoglobine libre si des globules rouges ont été endommagés. La quantité d'hémoglobine libérée et par extension la proportion de globules rouges affectés peuvent être déterminées par une mesure d'absorbance avec le lecteur de plaques ( Varioskan  ). Chaque test de potentiel hémolytique est contrôlé par du sang sans agent hémolytique et du sang complètement hémolysé par un agent hémolytique connu, comme par exemple des saponines. Le test de potentiel hémolytique résulte en une concentration hémolytique à 50%, c'est-à-dire la concentration nécessaire pour provoquer la libération de 50% de l'hémoglobine.

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