mercredi 1 juin 2016

Anti-inflammatoire

Courbe standard d'une réaction de Gries pour doser les oxydes nitriques. 
Notre test anti-inflammatoire consiste à mesurer l’inhibition de la production d’oxyde nitrique (NO) produit par des macrophages de souris (RAW 264.7). Chaque activité anti-inflammatoire est contrôlé en comparaison avec un inhbiteur de l'iNOS, le L-name.
Brièvement, notre test consiste à mettre en plaque des macrophages de souris et de les incuber avec les échantillons à différentes concentrations. Du LPS (ou de l'interféron gamma) est ajouté dans les plaques pour provoquer une réaction inflammatoire chez les macrophages et stimuler la production de NO. Après incubation, les surnageants sont recueillis et mis en contact avec un réactif de dosage qui change de couleur en présence de NO (réactif de Griess). Une mesure de l'absorbance de chaque puits est effectuée au lecteur de plaque (Varioskan ). Les plaques vides de leur surnageant sont utilisées pour faire un test d'activité métabolique à la résazurine. Les lectures de fluorescence sont prises au lecteur de plaque (Fluoroskan ).

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